产品货号：
WE0286
中文名称：
SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)
英文名称：
SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)
产品规格：
200ml
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
本制品为配制SDS-PAGE浓缩胶缓冲液，可用于配制各种浓度的变性及非变性PAGE凝胶，方便、快捷。产品中已加入10%SDS，使用时不用另外加入。
保存：2～8℃
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，最佳胶浓度请参考附表1。
附表1.SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
附表2.配制SDS-PAGE分离胶
附表3.配制5%SDS-PAGE浓缩胶
相关搜索：SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×)，SDS-PAGE浓缩胶缓冲液，SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)
| 组分 | 规格 |
| SDS-PAGE浓缩胶缓冲液(4×) | 200mL |
| 说明书 | 1份 |
保存：2～8℃
根据目的蛋白分子量大小选择合适的PAGE分离胶配制浓度，最佳胶浓度请参考附表1。
- I灌制分离胶
各试剂使用量请参考附表2- 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
注：加入上层筛板有助于加样时保持填料与样品均匀接触，是否加入上层筛板可根据实际情况选择。 - 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、分离胶缓冲液和纯水在小烧杯或试管中混合。
- 加入10%APS和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
- 在凝胶模具中灌入适量分离胶溶液(对于mini-gel，凝胶液加至约距前玻璃板顶端1.5cm或距梳齿约0.5cm即可)，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1cm的水层，使凝胶表面保持平整。
- 静置30～60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面后，表面凝胶已聚合。
- 参照凝胶模具说明书，装配好凝胶模具。
- 灌制浓缩胶
各试剂使用量请参考附表3- 去除覆盖在分离胶上的水层。
- 将不同体积的30%Acr-Bis(29:1)、SDS-PAGE Stacking Gel Buffer(4×)浓缩胶缓冲液和纯水在一个小烧杯或试管中混合。
- 加入10%过硫酸铵和TEMED，轻轻搅拌使其混匀，避免产生气泡。
- 将浓缩胶溶液加至分离胶的上面，直至凝胶溶液到达前玻璃板的顶端。
- 将梳子插入凝胶内，避免产生气泡。
- 静置10～20分钟，等待浓缩胶聚合。
- 待凝胶聚合后，小心地拔出梳子，以免破坏加样孔。
- 进行常规电泳操作。
- 去除覆盖在分离胶上的水层。
附表1.SDS-PAGE分离胶的浓度与最佳分离范围
| SDS-PAGE分离胶浓度 | 最佳分离范围 |
| 6%胶 | 50～150kD |
| 8%胶 | 30～90kD |
| 10%胶 | 20～80kD |
| 12%胶 | 12～60kD |
| 15%胶 | 10～40kD |
附表2.配制SDS-PAGE分离胶
| 分离胶浓度 | 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位：ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 分离胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | ||
| 6% | 5mL | 2.75 | 1.0 | 1.25 | 0.05 | 0.004 |
| 10mL | 5.5 | 2.0 | 2.5 | 0.1 | 0.008 | |
| 15mL | 8.25 | 3.0 | 3.75 | 0.15 | 0.012 | |
| 20mL | 11 | 4.0 | 5 | 0.2 | 0.016 | |
| 8% | 5mL | 2.42 | 1.33 | 1.25 | 0.05 | 0.003 |
| 10mL | 4.8 | 2.7 | 2.5 | 0.1 | 0.006 | |
| 15mL | 7.25 | 4.0 | 3.75 | 0.15 | 0.009 | |
| 20mL | 9.7 | 5.3 | 5 | 0.2 | 0.012 | |
| 10% | 5mL | 2.08 | 1.67 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10mL | 4.17 | 3.33 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15mL | 6.25 | 5.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20mL | 8.3 | 6.7 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 12% | 5mL | 1.75 | 2.0 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10mL | 3.5 | 4.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15mL | 5.25 | 6.0 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20mL | 7.0 | 8.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
| 15% | 5mL | 1.25 | 2.5 | 1.25 | 0.05 | 0.002 |
| 10mL | 2.5 | 5.0 | 2.5 | 0.1 | 0.004 | |
| 15mL | 3.75 | 7.5 | 3.75 | 0.15 | 0.006 | |
| 20mL | 5 | 10.0 | 5 | 0.2 | 0.008 | |
附表3.配制5%SDS-PAGE浓缩胶
| 凝胶体积 | 所需各组分体积(单位：ml) | ||||
| 纯水 | 30%Acr-Bis(29:1) | 浓缩胶缓冲液(4×) | 10%APS | TEMED | |
| 2mL | 1.14 | 0.34 | 0.5 | 0.02 | 0.002 |
| 4mL | 2.28 | 0.68 | 1 | 0.04 | 0.004 |
| 6mL | 3.42 | 1.02 | 1.5 | 0.06 | 0.006 |
| 8mL | 4.56 | 1.36 | 2 | 0.08 | 0.008 |
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